Провоспалительные цитокины в регуляции процессов воспаления и репарации

Pages: | 1 |

| 3 | 4 | … | 9 |

— [ Страница 2 ] —

Основные результаты диссертации опубликовано в 71 печатной работе, из которых 21 статья в журналах, рекомендованных ВАК РФ для публикации материалов докторских и кандидатских диссертаций («European Cytokine Network», «Иммунология», «Вестник хирургии», «Российский иммунологический журнал» («Russian Journal of Immunology»), «Цитокины и воспаление», «Медицинская иммунология», «Грудная и сердечно-сосудистая хирургия», «Российская оториноларингология», «Журнал микробиологии, эпидемиологии и иммунобиологии»), 6 статей в научных журналах, 40 публикаций в материалах научных конгрессов и конференций, одна глава в книге, три патента.

Структура и объем диссертации

Работа состоит из введения, обзора литературы, описания материалов и методов, шести глав изложения результатов исследований, обсуждения результатов и списка литературы. Диссертация изложена на 296 страницах, включает в себя 20 таблиц и 30 рисунков. Список цитируемой литературы состоит из 368 источников, в том числе 62 отечественных и 306 иностранных.

СОДЕРЖАНИЕ РАБОТЫ

МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ

Иммунологические исследования выполнены на базе лаборатории иммунофармакологии ФГУП Гос. НИИ ОЧБ ФМБА.

Выделение мононуклеаров и нейтрофилов из гепаринизированной венозной крови проводили, как описано у Boyum A., 1968, путем центрифугирования в градиенте плотности. Подсчет количества лейкоцитов и лейкоцитарной формулы крови, взятой с антикоагулянтом ЭДТА, проводили с помощью гематологического анализатора фирмы “Beckman Coulter”. Оценку субпопуляционного состава лимфоцитов крови проводили методом проточной цитометрии на проточном цитофлюориметре COULTER EPICS XL (“Beckman Coulter”, США) с использованием моноклональных антител к CD3, CD4, CD8, СD16, CD19, CD25 и HLA-DR (“Caltag”, США). Измерение концентраций цитокинов в сыворотке крови, супернатантах клеток и содержимом очагов воспаления проводилось методом твердофазного иммуноферментного анализа (ИФА) с использованием в качестве фермента пероксидазы хрена. Использовали тест-системы для определения IL-1, IL-1, IL-8, TNF- (ООО «Цитокин», Россия) и IL-6 Quantikinine” (“R&D systems”, США) в соответствии с рекомендациями фирм-производителей, результаты считывали на спектрофотометре для планшетов (модель 3550 (Bio-Rad)). Индукцию продукции цитокинов проводили в цельной крови, в качестве индуктора использовали продигиозан. Содержание IL-2 в супернатантах клеток крови определяли с помощью IL-2-зависимой линии CTLL-2 в биологическом тесте (Gillis S. et al., 1978). Результаты учитывали на жидкостном сцинтилляционном счетчике (Rackbeta 1217, Wallac, Finland), Функции нейтрофилов. Направленную миграцию нейтрофилов под агарозой изучали по методу Nelson K.D, 1975. Уровень продукции активных форм кислорода нейтрофилами оценивали в НСТ-тесте в планшетах по методу Rook J.A.W. et al., 1985. Окислительный взрыв в фагоцитирующих клетках изучали методом люминол-зависимой хемилюминесценции в цельной крови на приборе Victor-2 (Финляндия). Адгезию нейтрофилов к пластику оценивали в тесте на планшетах. В тестах на планшетах результаты определяли на спектрофотометре для планшет модель 3550 (Bio-Rad). Фагоцитарную активность нейтрофилов оценивали с использованием опсонизированных дрожжей и подсчитывали результаты под микроскопом (Root R.K. et al., 1975). Уровень продукции активных форм кислорода нейтрофилами, полученными из очага воспаления, оценивали в НСТ-тесте на стеклах (Och H.D. et al., 1973). Подсчет цитологического состава на мазках крови и содержимого воспалительного очага, мазках-отпечатках из ран проводился под световым микроскопом после окрашивания по Романовскому-Гимзе. Для цитологического исследования с поверхности трофических язв и ран делали мазки-отпечатки по методу Покровской Т.М. (1942), клетки раневого очага получали по методу «поверхностной биопсии» по Камаеву М.Ф. (1970). При гнойно-воспалительных заболеваниях получали содержимое воспалительного очага аспирацией или делали смывы. Продукцию цитокинов в биоптатах и мазках клеток проводили методом непрямой иммуногистохимии с использованием моноклональных и поликлональных антител к IL-1, IL-1, IL-8, TNF- (Гос. НИИ ОЧБ, Россия), IL-6 (R&D systems, Германия), вторых анти-мышиных или анти-кроличьих биотинилированных антител и конъюгата стрептавидин-щелочная фосфатаза («Sigma», США). Подсчитывали активность продукции цитокинов (среднее количество положительных клеток в поле зрения на срезе) при увеличении в 640 раз, в среднем на 3-х срезах с каждого биоптата. Оценивали частоту выявления продукции цитокинов (относительное количество пациентов в процентах, у которых определялась продукция цитокинов). Проводили гистохимические реакции на выявление миелопероксидазы (МПО) нейтрофилов с использованием диаминобензидина («Sigma», США) (Лойда и др., 1982), а также на выявление эндогенной перекиси водорода (Dannenberg A.M. et al., 1994).

В работе использовали рекомбинантный IL-1 человека (ФГУП Гос. НИИ ОЧБ ФМБА России) (в экспериментальных исследованиях) и созданный на его основе медицинский препарат «Беталейкин», разрешенный к клиническому применению (регистрационный номер 97/51/6) (в клинических исследованиях). Мазевая форма препарата представляла собой рекомбинантный IL-1 человека на ланолин-вазелиновой основе.

Получение биологического материала для исследований проводилось квалифицированными медицинскими работниками на базе клиник Санкт-Петербурга: ФГБУ «СПб НИИ ЛОР» МЗ России, клиники торакальной хирургии Военно-Медицинской Академии им. С.М. Кирова; на базах 1 и 4 хирургических отделений Центра по лечению хирургических инфекций (городская больница № 5 Санкт-Петербурга) и 1 и 2 хирургических отделений Балтийской клинической центральной бассейновой больницы Санкт-Петербурга; клинике челюстно-лицевой и пластической хирургии СПбГМУ им. Павлова, г. Санкт-Петербург; в консультативно-диагностическом центре для детей № 2 СПбГУЗ «Городская поликлиника № 23» и дневном гастроэнтерологическом стационаре детской поликлиники № 77 Приморского района г. Санкт-Петербурга.

Экспериментальные исследования выполнены во ФГУП Гос. НИИ ОЧБ ФМБА России. Использовали модель осложненного заживления полнокожной раны у мышей на фоне иммуносупрессии. Исследование влияния гидрокортизона (ГК) на параметры заживления ран у мышей выполнено на 211 белых беспородных мышах-самцах весом 22-25 г. (ФГУП «Питомник лабораторных животных «Рапполово» РАМН). Действие мазевой формы с содержанием IL-1 50 нг/мл изучено в опытах, в которых использовали 145 белых беспородных мышей-самцов весом 22-25 г. (ФГУП «Питомник лабораторных животных «Рапполово» РАМН) и 87 белых беспородных мышей-самцов SPF (specified pathogen free, не несущие специфицированную патогенную микрофлору) весом 30-45 г. (питомник Charles River, Венгрия). Мыши SPF содержались в стерильных условиях во время всего эксперимента. Мышам наносили раны скальпелем для кожных биопсий диаметром 4 мм (“Acupunch”, USA). Вводили ГК в/м 25 мг/кг («Гедеон Рихтер», Венгрия) один раз в день в течение всего опыта, первый раз – за один день до нанесения ран. Со следующего дня после нанесения ран наносили мазь с IL-1 (50 нг/мл) или плацебо (мазевую основу) ежедневно в течение опыта. Оценивали параметры заживления в динамике на 3, 5, 7, 9, 11, 13 сутки лечения.

Площади ран кожи у мышей определяли планиметрическим методом. Для этого раны фотографировали цифровой камерой, переносили на компьютер, площади ран измеряли с использованием компьютерной программы ImageJ 1,35r (NIH, США). Гистологические методы включали окраски по Масону и гематоксилином-эозином. Использовали систему визуализации изображений, состоящую из светового микроскопа DMLB, цифровой камеры DC 300 (Leica, Германия) и компьютера. Проводили электронно-микроскопическое исследование эпителия ран у мышей. Обработку ультратонких срезов проводили методом двойного контрастирования уранилацетатом и цитратом свинца, препараты просматривали в трансмиссионном электронном микроскопе JEM-100C (JEOL, Япония) (Миронов А.А. с соавт., 1994). Исследование экспрессии белков плотных контактов проводилось с помощью метода непрямой иммуногистохимии с использованием первых антител к окклюдину, клаудину-1 и ZO-1 (Zymed Laboratories, США), вторых антител, меченных FITC. Препараты изучали с использованием конфокального лазерного микроскопа Zeiss LSM510 (Carl Zeiss, Германия). Исследование экспрессии белков плотных контактов проведено сотрудниками Санкт-Петербургского Государственного университета.

Статистическую обработку результатов проводили с использованием компьютерных программ SPSS 17,0 for Windows и «Excel». Подсчитывали среднее значение и ошибку среднего M ± m. Различия между группами оценивали с использованием Т-теста Стьюдента для независимых переменных, теста Вилкоксона-Манна-Уитни, ANOVA, сравнение парных показателей проводили с использованием парного Т-теста Стьюдента. Различия считались достоверными при вероятности 95% (р<0,05) или 99% (p<0,01).

РЕЗУЛЬТАТЫ И ОБСУЖДЕНИЕ

Изучение особенностей продукции провоспалительных цитокинов при гнойно-воспалительных заболеваниях у человека

Иммунологические исследования были проведены у пациентов с диагнозом «хронический гнойный риносинусит» (ХГРС) (71 человек), которые находились в стадии обострения заболевания. Для сравнительной оценки исследования проводили также у 49 условно здоровых доноров. Для исследований получали периферическую кровь, содержимое верхнечелюстных пазух носа у пациентов с ХГРС и кровь у доноров.

У пациентов с ХГРС общее количество лейкоцитов крови значительно не отличалось от показателей в группе доноров, находилось в пределах нормы, но при этом в формуле крови наблюдалось увеличение процента палочкоядерных и юных нейтрофилов. Оценка содержания субпопуляций лимфоцитов крови показала, что относительное и абсолютное количество лимфоцитов, количество CD3+, CD4+, CD8+, CD25+ лимфоцитов, а также соотношение CD4+/CD8+ не различалось между группами больных ХГРС и доноров (табл. 1). Относительное и абсолютное количество HLAII+ лимфоцитов было выше у больных ХГРС. Абсолютное число CD16+ клеток (NK клетки) было повышенным при ХГРС. Процент CD19+ (В клетки) у пациентов с ХГРС превышал показатели у доноров. Воспаление играет ключевую роль в патогенезе хронического риносинусита (Benninger M.S., et al., 2003; Hamilos D.L., 2000). Иммунологические показатели свидетельствуют о том, что больные ХГРС находились в стадии обострения хронического воспалительного процесса.

В группе пациентов с ХГРС наблюдалось снижение показателей индуцированной продукции IL-1 по сравнению с группой доноров (рис. 1А). Уровни спонтанной продукции IL-8 при ХРГС превышали таковые у группы доноров в среднем в шесть раз (рис. 1Б), при этом уровни индуцированной продукции IL-8 не различались между группами. У пациентов с ХГРС также выявляется дефицит продукции IL-1. Гиперпродукция IL-8 в периферической крови, по-видимому, отражает воспалительную реакцию, причиной которой является неэффективное местное воспаление.

Спонтанная продукция IL-2 не наблюдалась ни у больных, ни у доноров и была равна нулю. Показатели индуцированной продукции IL-2 были резко снижены у больных ХГРС по сравнению с донорами (рис. 2В). Низкие уровни продукции IL-2 свидетельствуют о снижении функциональной активности лимфоцитов у пациентов при ХГРС.

Поскольку к настоящему времени иммунный ответ в слизистой оболочке пазух носа при инфекциях остается недостаточно изученным, было проведено исследование продукции цитокинов, функций нейтрофилов и цитологической картины в содержимом верхнечелюстных пазух у больных ХГРС. В содержимом пазух были определены следующие цитокины: уровни IL-1 — 81,46 ± 29,44 пг/мл, выявлен в 56,7% случаев (n=64), IL-6 – 219,07 ± 25,29 пг/мл, определен в 64,5% случаев (n=62), IL-8 – 866,34 ± 181,09 пг/мл, обнаружен в 67,1% случаев (n=70). IL-1 не был выявлен ни у одного пациента. Проводили сравнение уровней цитокинов у одних и тех же пациентов в периферической крови и в очаге воспаления. Результаты показали, что в пазухах носа уровни IL-1 и IL-8 у пациентов с ХГРС превышают соответствующие показатели в сыворотке крови тех же пациентов, а также уровни цитокинов у доноров (табл. 2). Полученные данные согласуются с результатами Demoly P., et al., 1997, которые показали, что у пациентов с хроническим синуситом в лаважах из верхнечелюстных пазух содержатся значительные количества нейтрофилов, а уровни IL-8 повышены. При исследованиях было выявлено увеличение продукции IL-1, IL-6 и IL-8, а также выраженная нейтрофильная инфильтрация в слизистой оболочке пазух носа у пациентов с острыми респираторными инфекциями (Bachert C., 1998).

Цитологическое исследование содержимого верхнечелюстных пазух проведено у 57 пациентов с ХГРС. Исследование показало, что преобладающим типом клеток в очаге воспаления являются нейтрофилы (83,89 ± 2,94%), в небольшом количестве наблюдаются макрофаги (1,51± 0,47%) и лимфоциты (5,15 ± 1,07%), а также эозинофилы (1,36 ± 0,33%). Эпителиальные клетки в препаратах присутствовали у 32 пациентов в количестве 9,00 ± 2,62%.

Таблица 1. Сравнительная оценка содержания субпопуляций лимфоцитов в периферической крови пациентов ХГРС и здоровых доноров

Груп-пы

Относительное количество клеток (%), M ± m

Лимфо-циты

CD3+

CD4+

CD8+

CD4+/

CD8+

CD25

HLA II

CD16

CD19

ХГРС

n=50

33,84 ± 1,28

62,03 ± 1,84

38,48 ± 1,50

24,09 ± 0,80

1,69 ± 0,09

2,56 ± 0,24

19,89 ± 1,73

14,87 ± 1,20

14,39 ± 1,54

Доноры n=45

35,27 ± 1,40

62,46 ± 2,11

40,02 ± 1,49

22,18 ± 1,03

1,99 ± 0,13

2,82 ± 0,31

12,20 ± 0,62

11,96 ± 0,94

9,27 ± 1,35

>0,05

0,0001

0,06

0,01

Груп-пы

Абсолютное количество клеток (млн/мл), M ± m

Pages: | 1 |

| 3 | 4 | … | 9 |

Источник

Pages: | 1 | … | 6 | 7 |

| 9 |

— [ Страница 8 ] —

Примечание: * — различия достоверны с контрольной группой, p<0,05, + — различия достоверны с данными до лечения, p<0,05.

А Б Изменения содержания цитокинов в раневой жидкости при-17 А

Б Изменения содержания цитокинов в раневой жидкости при-18 Б

Рисунок 13. Изменения содержания цитокинов в раневой жидкости при применении IL-1 у пациентов с флегмонами ЧЛЛ. А) IL-1. Б) IL-8. Примечание: * — различия достоверны с группой, получавшей обычное лечение, p<0,05. Количество пациентов: IL-1 — n=11, обычное лечение – n=10.

У 34 пациентов с флегмонами ЧЛЛ в динамике терапии было выполнено исследование бактерицидной и фагоцитарной функции нейтрофилов, полученных из раневого очага. Применение IL-1 приводило к увеличению показателей индуцированной ФМА продукции супероксидных радикалов и фагоцитарного индекса на 7 сутки. Результаты представлены в таблице 12.

Оценка содержания провоспалительных цитокинов в раневом отделяемом выполнена в динамике лечения IL-1 и при проведении стандартной терапии (рис. 13). До начала лечения уровни IL-1 и IL-8 в раневом отделяемом в обеих группах были сходными. После начала применения IL-1 на 4-е сутки концентрации IL-8 превышали его уровни в группе пациентов, получавших обычное лечение. На седьмые сутки терапии уровни эндогенного IL-1 снижались в группе пациентов, которым применяли IL-1, в то время как в группе пациентов, получавших обычное лечение, концентрации эндогенного IL-1 оставались на прежнем уровне.

Изучение клинической эффективности применения IL-1 у пациентов с флегмонами ЧЛЛ показало, что происходит ускорение сроков очищения раны, переход раневого процесса во вторую фазу и наблюдается быстрое активное гранулирование раны, а также сокращаются сроки лечения.

ВЫВОДЫ

При гнойно-воспалительных заболеваниях у человека наблюдается значительное снижение функциональной активности нейтрофилов в очаге воспаления, цитологическая картина характеризуется преобладанием нейтрофилов и уменьшением доли макрофагов и лимфоцитов. Происходит локальное повышение продукции провоспалительных цитокинов IL-1, IL-1, IL-6, IL-8 и TNF- при увеличении активности, тяжести воспалительного процесса, а также при наличии бактериальной инфекции.
Усиление продукции IL-1 и IL-8 в слизистой оболочке желудка является маркером инфицирования Н.pylory у детей с хроническими гастродуоденальными заболеваниями.
При применении мазевой формы рекомбинантного IL-1 человека в экспериментах у мышей происходит уменьшение размеров ран кожи, повышение количества клеток в грануляционной ткани и усиление эпителизации. Аппликации мазевой формы IL-1 в экспериментальных исследованиях не оказывают влияния на вес тела, вес селезенки, количество спленоцитов и лейкоцитарный состав периферической крови у мышей.
Использование мазевой формы рекомбинантного IL-1 человека у пациентов с длительно незаживающими ранами и трофическими язвами нижних конечностей стимулирует фагоцитарную и бактерицидную функции нейтрофильных гранулоцитов, а также вызывает увеличение количества макрофагов и клеток соединительной ткани в раневом очаге.
Местное применение рекомбинантного IL-1 человека при гнойно-воспалительных процессах стимулирует функциональную активность нейтрофилов (хемотаксис, фагоцитоз, бактерицидную функцию), вызывает повышение уровней IL-8, IL-6, а также увеличение синтеза IL-1, IL-8 и TNF- лейкоцитами в очаге воспаления. При местном применении IL-1 при гнойно-воспалительных заболеваниях у человека не наблюдается влияния на функции нейтрофилов и продукцию цитокинов в периферической крови.
Механизмы иммуностимулирующего действия IL-1 при местном применении связаны со стимуляцией синтеза провоспалительных цитокинов и активацией функций нейтрофилов в очаге воспаления у человека.

ПРАКТИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИ

Определение продукции цитокинов в очаге воспаления может служить маркером особенностей протекания воспалительного процесса. Метод иммуногистохимии является информативным для изучения местной продукции цитокинов при заболеваниях желудочно-кишечного тракта, а также воспалительных процессов в верхних и нижних отделах респираторного тракта. Результаты исследования продукции цитокинов могут служить основанием для индивидуального подбора терапии.

Рекомбинантный IL-1 человека может быть использован в качестве лечебного препарата в виде раствора для терапии хронических гнойных воспалительных процессов. Применение мазевой формы, содержащей IL-1, является перспективным направлением для лечения длительно незаживающих ран и трофических язв различной этиологии у человека.

СПИСОК РАБОТ, ОПУБЛИКОВАННЫХ ПО ТЕМЕ ДИССЕРТАЦИИ

Simbirtsev AS, Prokopieva ED, Ivanova EA, Konusova VG, Ketlinsky SA, Perumov ND. Interleukin-1 and tumor necrosis factor production by human monocytoid cells: study on a single cell level // European Cytokine Network. – 1992. –V. 3. – P. 421-428.
Симбирцев А.С., Конусова В.Г., Варюшина Е.А., Кетлинский С.А. Взаимосвязанные этапы транскрипции гена, трансляции МРНК и секреции биологически активного интерлейкина-1 моноцитами периферической крови человека // Иммунология. – 1995. — № 3. – С. 48-51.
Варюшина Е.А., Котов А.Ю., Симбирцев А.С., Кетлинский С.А., Саламатов А.В., Золотарев Д.В., Бисенков Л.Н. Изучение механизмов местного иммуностимулирующего действия интерлейкина-1. Повышение продукции провоспалительных цитокинов в очаге воспаления под влиянием интерлейкина-1 // Иммунология. – 2000. — № 4. – С. 45-48.
Варюшина Е.А., Конусова В.Г., Симбирцев А.С., Кетлинский С.А., Саламатов А.В., Золотарев Д.В., Бисенков Л.Н. Изучение механизмов местного иммуностимулирующего действия интерлейкина-1. Усиление функциональной активности нейтрофильных гранулоцитов человека в очаге воспаления под влиянием интерлейкина-1 // Иммунология. – 2000. — № 3. – С. 18-21.
Бисенков Л.Н., Симбирцев А.С., Золотарев Д.В., Cаламатов А.В., Варюшина Е.А. Местное применение рекомбинантного интерлейкина-1 в комплексном лечении больных с острыми абсцессами легких // Вестник хирургии. – 2001. — Т. 160. — №3. – С. 20-24.
Variouchina E.A., Antsiferova M.A., Aleksandrov G.V. Konusova V.G., Pigareva N.V., Petrov A.V., Simbirtsev A.S. Topical application of interleukine-1 accelerates wound healing in hydrocortisone-treated mice // Russian Journal of Immunology– 2003. – V. 8. – № 2-3. – P. 155-164.
Варюшина Е.А., Анциферова М.А., Александров Г.В., Минаева Е.Н., Пигарева Н.В., Петров А.В., Конусова В.Г., Исаева Е.Н., Бокованов В.Е., Котов А.Ю., Казаков А.А., Демьянов А.В., Симбирцев А.С. Модель осложненного течения раневого процесса у мышей на фоне иммуносупрессии, вызванной введением гидрокортизона // Цитокины и воспаление. – 2004. – Т. 3. — №. 4. – С. 14-20.
Бисенков Л.Н., Симбирцев А.С., Золотарев Д.В., Саламатов А.В., Варюшина Е.А. Местная иммунозаместительная терапия Беталейкином в комплексном лечении острых абсцессов легких с затяжным течением // Грудная и сердечно-сосудистая хирургия. – 2005. — №2. – С. 28-32.
Власова Г.В., Егоров Л.В., Котов А.Ю., Варюшина Е.А., Симбирцев А.С. Особенности общей и местной иммунологической реактивности у детей с хроническими средними отитами // Цитокины и воспаление. – 2005. – Т. 4. — № 4. – С. 39-44.
Варюшина Е.А., Симбирцев А.С.. Регуляторная роль интерлейкина-1 при заживлении ран кожи. Обзор // Russian Journal of Immunology. – 2006. – V.9. – S.3., P. 48-52.
Саламатов А.В., Баринов О.В., Синенченко А.Г., Варюшина Е.А., Конусова В.Г., Симбирцев А.С. Эффективность рекомбинантного ИЛ-1 в лечении гнойно-деструктивных заболеваний легких и плевры // Цитокины и воспаление. – 2006. – Т. 5. — № 4. – С. 39-45.
Варюшина Е.А., Москаленко В.В., Симбирцев А.С., Лебедева Т.П., Бубнов А.Н.. Ранозаживляющее и местное иммуностимулирующее действие рекомбинантного ИЛ-1 человека при применении у больных с длительно незаживающими ранами и трофическими язвами. // Цитокины и воспаление. – 2007. – T. 6. — № 2. – С. 54-62.
Е.А.Варюшина, В.В.Москаленко, Т.П.Лебедева, А.Н.Бубнов, А.С.Симбирцев. Использование интерлейкина-1 для местного лечения гнойно-некротических поражений нижних конечностей // Медицинская иммунология. – 2008. – Т. 10. — № 4-5. – С. 439-448.
Гуломов З.С., Симбирцев А.С., Янов Ю.К., Варюшина Е.А., Тырнова Е.В. Роль цитокинов при лечении острых и хронических заболеваний верхних дыхательных путей // Российская оториноларингология. – 2008 — №6(37) –С.200-205.
Варюшина Е.А., Козлова И.П., Котов А.Ю., Симбирцев А.С. Продукция провоспалительных цитокинов в слизистой оболочке желудка у детей с хроническими гастродуоденальными заболеваниями при инфекции Helicobacter pylori // Российский иммунологический журнал. – 2009. – Т. 3 (12). № 1. – С. 72-83.
Розломий В.Л., Варюшина Е.А., Рыбальченко О.В.. Динамика заживления экспериментальной раны у мышей под влиянием препарата интерлейкин-1 // Журнал микробиологии, эпидемиологии и иммунобиологии. – 2009. – № 5. – С. 79 – 82.
Дроздова М.В., Симбирцев А.С., Варюшина Е.А., Тырнова Е.В.. Продукция провоспалительных цитокинов в ткани глоточной миндалины при хроническом лимфопролиферативном синдроме у детей // Российская оторинолярингология. – 2009. — №5 (42). – С. 35-45.
Варюшина Е.А., Симбирцев А.С.. Инфекция Helicobacter pylori: регуляторная роль цитокинов при воспалении и аллергии. // Российский иммунологический журнал. – 2010. — №2. – С. 13 – 22.
Варюшина Е.А., Розломий В.Л., Александров Г.В., Рыбальченко О.В., Потокин И.Л., Исаева Е.Н., Симбирцев А.С. Влияние местного применения интерлейкина-1 на цитологические параметры заживления кожной раны // Цитокины и воспаление. – 2010. – Т. 9. — №2. – С. 7 -12.
Марков А.Г., Розломий В.Л., Варюшина Е.А., Александров Г.В., Симбирцев А.С.. Влияние ИЛ-1 на экспрессию белков плотных контактов при регенерации кожной раны на фоне иммуносупрессии. – Российский иммунологический журнал. – 2010. – Т. 4 (13). — № 1. – С. 54 – 59.
Варюшина Е.
А., Александров Г.В., Сазонова Т.А., Симбирцев А.С. Изучение влияния местного применения рекомбинантного человеческого интерлейкина-1 на репарацию язвенных повреждений слизистой оболочки желудка // Цитокины и воспаление. – 2012. – Т. 11. — №1, — с. 64 – 69.
Пат. 2355415, Российская Федерация, МПК7 А61Р1/04, А61К 38/20. Способ лечения повреждений слизистой оболочки желудочно-кишечного тракта / Симбирцев А.С., Ищенко А. М., Варюшина Е. А., Александров Г. В.; ФГУП «Гос. НИИ ОЧБ» ФМБА России, ООО «Цитокин». — №2007125264/14; заявл. 04.07.2007; опубл. 10.01.2009.
Пат. 2361606, Российская Федерация, МПК7 A61K 38/20, 61K33/10, A61K9/08, A61P1/04. Композиция для лечения повреждений слизистой оболочки желудочно-кишечного тракта / Симбирцев А.С., Ищенко А. М., Варюшина Е. А., Александров Г. В.; ФГУП «Гос. НИИ ОЧБ» ФМБА России, ООО «Цитокин». — № 2007125265/15; заявл. 04.07.2007; опубл. 10.01.2009.
Пат. 2432170, Российская Федерация, МПК А61К 38/20, А61Р 37/02. Интерлейкинсодержащая композиция (варианты) / Симбирцев А.С., Ищенко А. М., Пигарева Н.В., Петров А.В., Митрофанов Е.В., Котов А.Ю., Минаева Е.Н., Исаева Е.Н., Варюшина Е.А.; ООО «Цитокин». — № 2009110858/15; заявл. 26.03.2009, опубл. 10.10.2010.
Симбирцев А.С., Петропавловская О.Ю., Котов А.Ю., Варюшина Е.А. Местное применение препаратов рекомбинантного интерлейкина-1 бета человека при лечении гнойно-воспалительных заболеваний челюстно-лицевой локализации // Ученые записки СПГМГУ им. Акад. И.П.Павлова. – 2000. – Т. 7. — № 2. – С. 113-118.
Simbirtsev A., Variouchina E., Konusova V., Kotov A., Ketlinsky S., Salamatov A. and Bisenkov L. Local administration of interleukin-1beta for the treatment of lung abscesses induces neutrophil activation and changes in proinflammatory cytokine production // Eur.Cytokine Netw. – 2001. –V. 12. – P. 420-429.
Бисенков Л.Н., Симбирцев А.С., Золотарев Д.В., Леонович А.П., Варюшина Е.А., Саламатов А.В. Местное применение аутологичного лейкоцитоконцентрата и рекомбинантного интерлейкина-1 в комплексном лечении больных острых абсцессов легких // Aqua Vitae. Российский медицинский журнал.- 2001.- № 4.- С. 23-26.
Александрова В.А., Козлова И.П., Симбирцев А.С., Варюшина Е.А.. Клинико-иммунологические особенности детей с Helicobacter pylori-ассоциированной гастродуоденальной патологией // Российский семейный врач. –2002 — № 1. –– С. 30-33.
Соловьев М.М., Симбирцев А.С., Петропавловская О.Ю., Варюшина Е.А., Котов А.Ю. Препарат «Беталейкин» в лечении гнойно-воспалительных заболеваний челюстно-лицевой области // Terra Medica. – 2003. — № 2. – С. 14-16.
Варюшина Е.А., Москаленко В.В., Симбирцев А.С., Лебедева Т.П., Бубнов А.Н. Использование мази, содержащей интерлейкин-1, усиливает функции раневых нейтрофилов и повышает репаративные процессы при хронических ранах у человека // Вестник уральской медицинской академической науки. – 2006. — № 3-1 (14). – С. 29 – 32.
Варюшина Е.А., Конусова В.Г., Симбирцев А.С., Лишенко В.В., Саламатов А.В., Чуприна А.П. Изучение функциональной активности полиморфноядерных лейкоцитов у пациентов с легочными заболеваниями // Труды 3-й международной конференции «СПИД, рак и ретровирусы человека», г. Санкт-Петербург, Россия, 1995 г.
Бубнов А.Н., Симбирцев А.С., Лебедева Т.П., Москаленко В.В., Варюшина Е.А. Первый опыт применения интерлейкиновой мази // Хирургическая анатомия, техника и патофизиология. Сборник трудов МАПО, г. Санкт-Петербург, 1995, С. 109 – 111.
Varioushina E. Study of mechanism of local action on IL-1 during treatment of patients with chronic wounds // Papers of 4th International Conference “AIDS, Cancer and related problems”, St.-Petersburg, Russia, 1996, P. 91.
Simbirtsev A., Pigareva N., Kalinina N., Kotov A., Konusova V., Variuochina E., Popovich A. Immunotherapeutic application of recombinant human interleukin-1 beta // Eur. Cytokine Netw. – 1996. – V. 7. — № 3. – P. 651.
Бисенков Л.Н., Симбирцев А.С., Конусова В.Г., Варюшина Е.А., Попов В.И., Лишенко В.В., Саламатов А.В., Чуприна А.П. Применение препарата рекомбинантного интерлейкина-1 для лечения гнойно-деструктивных заболеваний легких // 6 Национальный конгресс по болезням органов дыхания. Новосибирск, 1-4 июля 1996 г. Сборник трудов (приложение к журналу Пульмонология). – С. 871.
Саламатов А.В., Лишенко В.В., Симбирцев А.С., Конусова В.Г., Варюшина Е.А., Суборова В.Г., Пасхина М.Н., Попов В.И., Лукин В.В., Чуприна А.П. Диагноcтичеcкие и лечебные возможноcти длительной тpанcназальной катетеpизации полоcти пpи инфекционныx деcтpукцияx легкиx // 6 Национальный конгресс по болезням органов дыхания. Новосибирск, 1-4 июля 1996 г. Сборник трудов (приложение к журналу Пульмонология). – С. 885.
Бисенков Л.Н., Симбирцев А.С., Конусова В.Г., Варюшина Е.А., Попов В.И.,, Саламотов А.В., Адмакин А.Л., Лишенко В.В., Чуприна А.П., Золотарев Д.В. Применение интерлейкина-1 в торакальной хирургии // Русский журнал ВИЧ/СПИД и родственные проблемы. – 1997. – Т. 1. — № 1. – С. 142.
Бисенков Л.Н., Саламатов А.В., Попов В.И., Симбирцев А.С., Конусова В.Г., Варюшина Е.А., Чуприна А.П., Золотарев Д.В. Применение рекомбинантного интерлейкина-1 человека для лечения больных с абсцессами легких// Усовершенствование методов и аппаратуры, применяемых в учебном процессе, медико-биологических исследованиях и клинической практике: Сб. изобретений и рационализаторских предложений ВмедА. – СПб.: ВмедА, 1997. – Вып. 28. – С. 12.
Бисенков Л.Н., Симбирцев А.С., Попов В.И., Лишенко В.В., Саламатов А.В., Конусова В.Г., Варюшина Е.А., Чуприна А.П., Ермаков Н.А., Адмакин А.В.
Pages: | 1 | … | 6 | 7 |
| 9 |

Источник